T-bet佐剂对Ag85B抗结核DNA疫苗的免疫调节

摘要：

目的:构建以Th1转录因子T-bet为基因佐剂的Ag85B新型DNA疫苗,并研究其免疫调控作用.方法:RTPCR法扩增出Ag85B基因和T-bet基因,克隆入pcDNA3.1质粒构建T-bet和Ag85B真核表达质粒,脂质体法转染重组质粒至RAW264.7细胞系,Western blot法检测质粒蛋白表达情况.3次肌肉注射免疫BALB/c小鼠,末次免疫2周后,ELISA法检测血清中抗Ag85B抗体滴度.同时将脾脏淋巴细胞悬液于Ag85B刺激下培养,ELISA法检测培养液中细胞因子分泌情况.结果:质粒蛋白成功表达,并且质粒剂量与质粒蛋白表达水平呈正相关.此外,T-bet/Ag85B不仅诱导IgG2a滴度显著增高伴随IgG1显著降低,而且还刺激IL-2/IFN-γ(Th1类)分泌增加伴随IL-4/IL-10(Th2类)减少.结论:T-bet增强抗Ag85B特异性IgG2a抗体反应,并诱导显著的Th1细胞优势免疫.

关键词：T-bet、Ag85B、疫苗、结核、免疫调节

所属期刊栏目：28

分类号：R392.12

资助基金：国家自然科学基金81041083;81172778;安徽省自然科学基金1208085QH162

在线出版日期：2012-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：680-683