人RUVBL2真核表达载体的构建及其在HeLa细胞中的表达
目的:构建带有绿色荧光蛋白的RUVBL2真核表达载体pEGFP-N1-RUVBL2,并鉴定其在HeLa细胞中的表达.方法:以pGADT7 -RUVBL2质粒为模板,PCR扩增RUVBL2基因,首先克隆至T载体中,进一步亚克隆至p-EGFP-N1,并对重组表达载体进行酶切及测序鉴定.采用脂质体转染法将重组质粒瞬时转染HeLa细胞系,应用荧光显微镜观察绿色荧光融合蛋白的表达,并用Western blot法检测RUVBL2-GFP融合蛋白的表达.结果:经限制性酶切鉴定及测序分析证实pEGFP-N1-RUVBL2载体序列正确；荧光显微镜下可见转染的HeLa细胞中有绿色荧光蛋白的表达,Western blot法证实转染细胞中能表达RUVBL2-GFP融合蛋白.结论:pEGFP-N1-RUVBL2表达载体构建成功,并在HeLa细胞内成功表达.
RUVBL2基因、真核表达载体、转染、HeLa细胞
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R34(人体生物化学、分子生物学)
国家自然科学基金31071020;81000272;江苏省自然科学基金BK09192
2012-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
586-587,591
