抗人Flt-1单克隆抗体的制备和活性鉴定

摘要：

目的:制备小鼠抗人血管内皮生长因子受体-1( Flt-1)的单克隆抗体(mAb),并鉴定其免疫学特性.方法:以重组人Flt-1胞外Ⅲ区蛋白为抗原,通过经典的杂交瘤制备和活性筛选方法建立能稳定分泌抗Flt-1蛋白的mAb杂交瘤细胞株.结果:经传统的小鼠腹水型抗体的制备和纯化方法获得了高纯度的抗人Flt-1胞外Ⅲ区蛋白的mAb.ELISA方法测定出该抗体的免疫球蛋白亚型为IgG1,轻链为K链.West-em blot结果显示该抗体能特异性地识别重组人Flt-1胞外Ⅲ区蛋白,FACS结果表明该抗体能结合到Flt-1阳性的脐静脉内皮细胞和K562/A02细胞表面,并呈现出抗体浓度依赖性.结论:成功建立了1株能够稳定分泌抗重组人Flt-1胞外Ⅲ区蛋白的mAb细胞株XA12,为今后进一步开展Flt-1及其胞外Ⅲ区蛋白的生物学功能研究以及基因工程抗体研究奠定了基础.

关键词：人血管内皮生长因子受体-1、单克隆抗体、血管新生、细胞因子

所属期刊栏目：28

分类号：R392.11

资助基金：国家重点基础研究发展计划9732012CB966400;国家自然科学基金30400405;天津市自然科学基金12JCZDJC24600

在线出版日期：2012-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：524-528