CGRP-shRNA慢病毒载体的构建与鉴定
目的:构建针对CGRP基因的shRNA载体并进行鉴定.方法:针对小鼠CGRP的mRNA序列,设计并合成编码的shRNA的两条寡核苷酸序列,经退火成互补双链,再克隆至质粒,构建重组体pLLU2G/CGRP,转化至stbl3细菌,挑选阳性克隆测序鉴定.慢病毒包装后,脂质体转导至neuro2A,显微镜观察荧光蛋白的表达.结果:测序证实质粒为所需的序列,脂质体转导至neuro2A 48 h后可见绿色荧光蛋白,转导率达90%.结论:成功地构建了针对CGRP基因的shRNA表达载体,为下一步进行RNAi的相关研究奠定了基础.
降钙素基因相关肽、shRNA、慢病毒
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R34(人体生物化学、分子生物学)
2012-06-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
413-414