超抗原葡萄球菌肠毒素与抗人大肠癌单链抗体ND-1scFv融合基因的构建、表达及活性分析

摘要：

目的:构建并表达超抗原葡萄(SEA)和鼠抗人大肠癌单链抗体ND-lscFv的融合蛋白,以提高SEA的靶向杀伤作用.方法:构建超抗原SEA和鼠抗人大肠癌单链抗ND-1 scFv的融合基因ND-1 scFv/SEA的表达载体,转化到大肠杆菌E.coli M15中进行诱导表达.Ni-NTA亲和层析对表达产物进行分离、纯化.间接免疫荧光法检测融合蛋白的靶向结合活性,MTT法检测靶向杀伤效率.结果:成功构建了融合基因ND-1 scFv/SEA,实现功能性表达,纯化的ND-1 scFv/SEA融合蛋白与表达有ND-1相应抗原的大肠癌细胞CCL-187有高度亲和活性,通过激活外周血单核细胞,可特异性杀伤靶细胞,在4 μg/mL浓度下对CCL-187的杀伤率达到91％,明显优于SEA的杀伤活性.结论:融合蛋白ND-1 scFv/SEA对大肠癌细胞CCL-187具有靶向结合和杀伤活性,为SEA用于靶向性的大肠癌治疗奠定了基础.

关键词：ND-1单克隆抗体、单链抗体Fv、葡萄球菌肠毒素A、大肠癌

所属期刊栏目：28

分类号：Q936(微生物学)

在线出版日期：2012-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：400-403