脂多糖活化的单核细胞对人Th17细胞分化的影响

摘要：

目的:拟建立体外人外周血CD4+T细胞与CD14+单核细胞共培养体系,观察脂多糖(LPS)活化的单核细胞,在联合或不联合抗CD3 mAb、不同浓度和时间条件下对诱导Th17细胞分化的影响.方法:采用免疫磁珠法分离纯化健康志愿者外周血CD4+T细胞与CD14+单核细胞,在两者共培养体系中分别单加LPS或抗CD3 mAb、抗CD3 mAb刺激下添加不同浓度LPS刺激培养3d或同时加入LPS和抗CD3 mAb刺激培养3～10d.以流式细胞术检测细胞表面分子CD4,胞内细胞因子IL-17及IFN-γ,确定各种刺激培养条件下,诱导生成的Th17及Th1等细胞亚群占CD4+T细胞的百分比.结果:单独采用LPS或抗CD3 mAb刺激,分别仅能诱导(1.30±0.19)％、(1.10±0.21)％CD4+T细胞分泌表达IL-17,而采用LPS联合抗CD3 mAb刺激显著增加Th17频率,可达(2.01±0.46)％(P＜0.05).在抗CD3 mAb刺激条件下,LPS浓度分别为0.1 μg/mL,1μg/mL,10 μg/mL时,诱导生成Th17细胞频率依次为(1.92±0.21)％、(1.30±0.37)％、(1.01±0.25)％,随LPS浓度增加,Th17细胞生成显著减少(P＜0.05).LPS体外刺激3d可诱导(2.13±0.32)％ Th17细胞生成,随时间推移,Th17细胞减少(P＜0.05),Th1细胞在6d达最高频率(17.45±3.04)％,10 d时下降到(11.34±1.29)％.结论:低剂量LPS联合抗CD3 mAb活化的单核细胞可在短时间内诱导CD4+T细胞向Th17细胞分化,所建立的共培养体系更加贴近类风湿关节炎等炎症性疾病体内异常免疫应答的微环境.

关键词：脂多糖(LPS)、Th17、Th1、单核/巨噬细胞、T淋巴细胞

所属期刊栏目：28

分类号：R392.12

在线出版日期：2012-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：377-380