高氧对脂多糖诱导N9小胶质细胞促炎症作用的影响
目的:观察常压高浓度氧对脂多糖诱导N9小胶质细胞Toll受体4、TNF-α表达时序变化,初步探讨高氧对小胶质细胞促炎反应的作用及调控机制.方法:体外培养N9小胶质细胞,随机分为6组(n=3):空气组、sLPS组、hLPS组、高氧组、高氧+ sLPS组、高氧+hLPS组.LPS浓度为100 ng/mL(sLPS)、1 mg/L( hLPS).高氧(900 mL/L)暴露时间分别为2h、6h、12 h、16 h、24h.RT-PCR检测TLR4的表达时序变化;Western blot检测处理12 h后各组TLR4蛋白表达;ELISA检测各组处理6h、12 h、16 h、24h培养上清中TNF-α的含量.结果:RT-PCR显示hLPS组在6h后、sLPS组在16 h后TLR4 mRNA均表达上调,并随LPS浓度增加、暴露时间延长逐渐升高(P<0.05),24 h时hLPS组表达最高.6h后在各个时间点高氧+ hLPS组与hLPS比较TLR4 mRNA下调(P<0.05),在16 h、24h最为明显(P<0.05).Western blot检测12 h高氧+sLPS组、高氧+hLPS组TLR4蛋白水平均低于相应浓度的LPS组(P<0.05).ELISA结果示在各个时间点高氧+ sLPS组、高氧+hLPS组与相应浓度的LPS组比较TNF-α均明显上调(P<0.05).结论:高浓度氧暴露促进LPS诱导N9小胶质细胞的促炎症反应,TLR4可能参与此过程的负向调控.
N9小胶质细胞、常压高浓度氧、脂多糖、TLR4、TNF-α
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R392.12
中国博士后基金20090450790
2012-04-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
268-271