1,25(OH)2D3对甲状旁腺素诱导的肾小管上皮细胞转分化和TGF-β1的表达的影响
目的:探讨1,25(OH)2D3对甲状旁腺素(PTH)诱导的肾小管上皮细胞转分化和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响.方法:人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)培养在含50 mL/L FCS的DMEM/F12培养液中.对照组:加入等体积含50 mL/L FCS的DMEM/F12培养液；PTH刺激组:加入终浓度为10-10 mol/L PTH的含50 mL/L FCS的DMEM/F12培养液；PTH +1,25(OH)2D3干预组:加入10-10 mol/L PTH,同时加入不同浓度( 10-10、10-9、10-8、10-7 mol/L)的1,25(OH)2D3.刺激HK-2细胞48 h.半定量RT-PCR法检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和TGF-β1的基因表达；Western blot法检测细胞中α-SMA和TGF-β1的蛋白表达；免疫细胞化学法检测细胞中α-SMA的表达；ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β1的含量.结果:半定量RT-PCR结果显示,对照组HK-2细胞中几乎无α-SMA的mRNA表达,仅有少量的TGF-β1mRNA表达；PTH刺激组α-SMA和TGF-β1mRNA表达量与对照组比较明显增加；PTH +1,25 (OH)2D3干预组表达量比PTH刺激组显著降低,且随着1,25(OH)2D3浓度的升高呈一定的剂量依赖性(P＜0.05).Westem blot结果显示,对照组HK-2细胞中无α-SMA的蛋白表达,仅有少量的TGF-β1蛋白表达；10-10 mol/L的PTH能够明显诱导HK-2细胞中α-SMA的蛋白表达,增加TGF-β1的蛋白表达量；PTH+1,25(OH)2D3干预组,α-SMA和TGF-β1的蛋白表达量比PTH刺激组显著降低(P＜0.05).免疫细胞化学法结果显示,对照组几乎无α-SMA阳性表达的细胞,PTH刺激组可见大量细胞α-SMA表达阳性；PTH +1,25(OH)2D3干预组α-SMA表达阳性的细胞数明显低于PTH刺激组(P＜0.05).ELISA结果显示,对照组细胞上清液中可检测到少量的TGF-β1,PTH刺激组含量显著升高,PTH +1,25(OH)2D3干预组与PTH刺激组比较含量明显降低(P＜0.05).结论:1,25(OH)2D3能够部分拮抗PTH诱导的HK-2细胞转分化和TGF-β1的表达.
1、25(OH)2D3、甲状旁腺素、肾小管、上皮细胞纤维化、转化生长因子-β1
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R392.11
2012-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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