阳离子脂质体介导IL-15基因治疗小鼠肺转移模型的实验研究
目的:用阳离子脂质体(CL)包裹pcDNA3.1-IL15制备阳离子脂质体质粒DNA复合物CL- IL15,观察其抗小鼠B16-F10肺转移瘤的治疗作用,并初步探讨其作用机制.方法:构建hIL-15真核表达载体,测定脂质体-质粒DNA复合物的最佳包封率；将该复合物转染CHO-K1细胞株,Westem blott检测体外转染条件下IL-15蛋白的表达情况,MTT法检测细胞转染上清对CTLL-2细胞株的增殖刺激作用；建立B16-F10小鼠黑色素瘤肺转移模型,尾静脉给药,每隔1d给药1次,共6次,治疗结束24 h后观察各组肿瘤肺转移情况；LDH释放法(乳酸脱氢酶释放法)检测脾淋巴细胞的杀伤作用,冰冻切片免疫荧光法观察NK细胞对肿瘤组织的浸润.结果:成功构建hIL-15表达载体,并验证其与阳离子脂质体的质量比为1:5时,包裹后形成的复合物具有较好的包封率；可以在体外有效转染并表达具生物活性的分泌型IL-15蛋白；CL- IL15复合物治疗小鼠肿瘤肺转移模型,可以显著减少肿瘤肺转移结节数目,提高脾细胞对肿瘤细胞杀伤活性(P＜0.05),增加NK细胞在肿瘤组织中的浸润比例.结论:阳离子脂质体质粒DNA复合物CL- IL15可有效地抑制小鼠B16-F10肺转移瘤,其作用机制可能与IL-15诱导脾细胞对肿瘤细胞的杀伤、激活NK( natural killer)细胞对肿瘤组织的浸润等机制有关.
阳离子脂质体、IL-15、B16-F10、肺转移、基因治疗
28
R392.11
国家重点基础研究发展计划973资助项目2010CB529900;国家重大新药创制项目资助2009ZX09103-714
2012-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
148-152
