TRBP分子克隆及其功能初步研究

摘要：

目的:构建TRBP原核表达载体,评价表达的重组TRBP蛋白对双链RNA的结合能力.方法:利用RT-PCR扩增小鼠TRBP基因双链RNA结合区,构建其与His标签融合的表达载体,转化E coli BI21( DE3)菌株,利用Ni-NTA磁珠对重组蛋白进行分离纯化；体外转录合成小鼠肝脏miR-122前体RNA Pre-miR-122,分别利用PAGE电泳和等温量热滴定仪检测TRBP与Pre-miR-122的结合能力.结果:分离纯化得到的重组TRBP蛋白为可溶蛋白,Mr为32 400,结合在NINTA磁珠上的TRBP能有效的结合Pre-miR-122.结论:成功建立了TRBP原核表达系统,初步研究了TRBP重组蛋白与双链RNA的结合能力.

关键词：RNA结合蛋白TRBP、原核表达、分子间相互作用

所属期刊栏目：28

分类号：Q522(核酸)

资助基金：国家自然科学基金31070712;31000361

在线出版日期：2012-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：124-126,129