禽流感病毒(H5N1)血凝素蛋白真核表达载体的构建与表达
目的:构建禽流感病毒(H5N1)血凝素蛋白HA真核表达载体并表达其编码蛋白(转染293T细胞).方法:从江苏H5N1流感病毒毒株(A/Jiangsu/07-4(H5N1))提取病毒RNA,采用RT-PCR技术扩增HA全长基因,将其克隆至pMD18-T Vector中构建pMD18-T-HA质粒,双酶切pMD18-T-HA与PXJ40-MYC后,构建真核表达载体PXJ40-MYC-HA,经酶切及测序鉴定后将质粒转染到293T细胞中,通过Western blot鉴定HA蛋白的表达.结果:经双酶切、测序鉴定证实HA基因的真核表达载体构建成功.Western blot法可见HA基因编码蛋白的成功表达.结论:成功构建了H5N1血凝素真核表达载体,该表达载体的构建为后期建立稳定表达HA蛋白的细胞模型和HA蛋白功能研究奠定了基础.
禽流感病毒、H5N1、HA、真核表达、免疫印迹
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Q78(基因工程（遗传工程）)
江苏省自然科学基金BK2009431;江苏省卫生厅资助项目H200857
2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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