SYBR green Ⅰ实时荧光PCR法检测KIR基因型

摘要：

目的:建立一种新的杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因分型方法.方法:利用16对KIR序列特异性引物和两对内参照引物及荧光染料SYBR Green Ⅰ进行实时聚合酶链反应( real-time PCR),分析各扩增产物的熔解曲线,确定各个KIR基因熔解温度和特征,并以此为依据判断16种KIR基因的出现或缺失.对样本DNA进行不同倍数稀释检测该方法的敏感性.结果:分析熔解曲线能有效地进行KIR基因分型.该方法甚至可以对0.1 ng DNA的样本成功进行KIR分型.利用该方法成功地对10例外周血基因组DNA和10例宫颈细胞基因组DNA进行了KIR分型.结论:SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR应用于KIR基因分型,具有简单、快速、敏感、实时和环保的特点,为实现KIR分型的自动化提供可能性.

关键词：杀伤细胞免疫球蛋白样受体、基因分型、实时聚合酶链反应、熔解曲线

所属期刊栏目：27

分类号：R331(人体生理学)

资助基金：武进科技计划项目WS2010012

在线出版日期：2012-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1295-1297,1300