鼠抗人PD-L1功能性单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定

摘要：

目的:研制特异性鼠抗人PD-L1单克隆抗体(mAb)并鉴定其生物学特性.方法:以高表达人PD-L1分子的基因转染细胞L929/PD-L1为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,以L929/PD-L1细胞为抗体筛选细胞,L929/mock细胞为对照细胞,经选择性克隆化培养及流式细胞术(FCM)分析,筛选稳定和持久分泌鼠抗人PD-L1 mAb的杂交瘤细胞株；采用Ig亚型快速定性试纸法、Western blot、间接免疫荧光法和竞争结合抑制实验等方法对mAb进行生物学特性鉴定；继而体外实验分析mAb对T细胞增殖的影响.结果:成功获得3株鼠抗人PD-L1mAb,分别命名为11G8,2G5和5C3；对其生物学功能的研究结果显示,3株mAb均能识别活化T细胞表面PD-L1分子,和在体外显著促进T细胞的增殖.结论:获得的3株鼠抗人PD-L1功能性mAb,通过阻断PD-1/PD-L1抑制途径能够有效增强T细胞体外增殖,这为进一步研究PD-1/PD-L1信号通路提供了物质基础.

关键词：协同刺激分子、PD-L1、单克隆抗体、T细胞

所属期刊栏目：27

分类号：R392.11

在线出版日期：2012-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1208-1211