迟缓爱德华菌HB01外膜蛋白OmpS2基因的克隆表达及其免疫原性研究

摘要：

目的:构建重组菌株BL21( DE3)(pET-28a-OmpS2),制备防治鱼类爱德华氏菌病的基因工程疫苗.方法:根据GenBank报道的致病性迟缓爱德华菌外膜蛋白OmpS2基因(AY078509)序列设计引物,通过PCR扩增得到大小为1 284 bp的迟缓爱德华菌(E.t.)HB01的外膜蛋白基因OmpS2.将该基因定向克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,并转化大肠杆菌BL21(DE3),得到重组菌株BL21(DE3)(pET-28a-OmpS2).经IPTG诱导后,由SDS-PAGE分析可见Mr在47000的特异蛋白条带.结果:Western blot检测说明表达的外膜蛋白具有较好的反应原性.将重组菌株BL21 (DE3)(pET-28a-OmpS2)制成基因工程疫苗,与嗜水气单胞菌(A.h.)溶血素(Hly)基因工程疫苗联合使用分别免疫小鼠与牙鲆(Paralichthys olivaceus)后,获得了较高的保护率,ELISA实验结果表明两种基因工程疫苗均能产生较高抗体水平.结论:本实验制备的基因工程疫苗能有效的预防鱼类爱德华氏菌病,且保护率高,能够起到免疫预防效果.

关键词：牙鲆、腹水病、迟缓爱德华菌、嗜水气单胞菌、免疫原性

所属期刊栏目：27

分类号：S941(水产保护学)

资助基金：河北省重大科技攻关项目06780503

在线出版日期：2011-12-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1075-1078,1082