BIRC5shRNA慢病毒表达载体的构建与鉴定

摘要：

目的:应用RNA干扰技术,以人BIRC5基因为靶基因,设计合成3对短发夹结构的互补DNA序列和一对阴性对照序列,构建慢病毒干扰载体并鉴定.方法:将设计合成的单链引物退火成双链oligo序列,连接入经Age Ⅰ和EcoR I 双酶切线性化的pMAGic慢病毒质粒载体中,经转化DH5a感受态细胞并筛选出阳性克隆,采用PCR扩增和DNA测序鉴定阳性克隆.结果:PCR扩增产物经凝胶电泳阳性克隆得到335 bp条带,阴性克隆得到298 bp条带,DNA测序结果证实其含设计合成序列.结论:4对BIRC5 shRNA重组慢病毒表达载体构建成功,为研究靶向BIRC5 siRNA对肿瘤细胞增殖抑制与诱导凋亡作用及基因治疗研究奠定了实验基础.

关键词：RNA干扰、BIRC5、慢病毒表达载体

所属期刊栏目：27

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：陕西省社发攻关资助项目2009K12-01

在线出版日期：2011-09-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：767-769