小鼠Foxp3基因慢病毒载体构建及其在DC2.4细胞的表达
目的:构建小鼠Foxp3基因的慢病毒载体,体外感染树突状细胞DC2.4,制备Foxp3+DC细胞,为进一步研究其免疫调节作用奠定基础.方法:将小鼠Foxp3基因克隆到慢病毒pGC-FU载体,通过PCR和测序鉴定获得连接正确的克隆.将鉴定后的重组表达质粒pGC-FU-Foxp与pHelper1.0质粒和pHelper2.0质粒共转染293T细胞,制备携带Foxp3基因的慢病毒Lentivirus-Foxp3.Lentivirus-Foxp3感染体外培养的DC细胞,流式细胞术(FCM)检测感染后的DC细胞Foxp3表达.结果:构建的慢病毒载体pGC-FU-Foxp3经PCR鉴定和测序正确,包装慢病毒Lentivirus-Foxp3滴度为2×108TU/mL.慢病毒Lentivirus-Foxp3感染DC2.4细胞后Foxp3表达明显增加.结论:成功构建了小鼠Foxp3基因的慢病毒表达载体,慢病毒Lentivirus-Foxp3能有效感染DC细胞.
Foxp3、慢病毒、DC2.4
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P392.12
国家自然科学基金资助项目30973245;中国博士后科学基金资助项目20100471821
2011-09-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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