小鼠TERT启动子调控的CD80-SEA基因重组腺病毒载体的构建及在肝癌细胞中的表达鉴定

摘要：

目的:构建小鼠端粒酶反转录酶(mTERT)启动子调控的葡萄球菌肠毒素A(SEA)和CD80基因共表达重组腺病毒载体,并观察其介导的SEA和CD80在小鼠肝癌细胞Hepal-6中的表达情况.方法:采用AdEasy腺病毒体系,亚克隆mTERT核心启动子区至穿梭质粒pShuttle2,并在其上游插入myc-Max反应元件MMRE,用来调控SEA及CD80基因的表达,构建SEA和CD80基因共表达重组腺病毒载体AdMMRE-mTERT-BIS,制备病毒并纯化,然后将病毒以感染复数为100的浓度分别感染肝癌细胞系Hepal-6和成纤维细胞系NIH3T3.采用免疫荧光染色法检测SEA和CD80在细胞膜表面的表达情况.结果:重组腺病毒载体Ad-MMRE-mTERTBIS感染的Hepal-6肝癌细胞膜上能够共表达SEA和CD80;而病毒感染的NIH3T3细胞不能表达SEA和CD80.结论:成功地构建了mTERT启动子调控的SEA和CD80基因共表达重组腺病毒载体,能够调控SEA和CD80基因在肝癌细胞中的靶向表达,为进一步研究肝癌的靶向基因治疗奠定了基础.

关键词：葡萄球菌肠毒素A、CD80、端粒酶反转录酶启动子、腺病毒

所属期刊栏目：27

分类号：R392.12

资助基金：国家自然科学基金资助项目30772524

在线出版日期：2011-09-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：717-720