抗血小板膜糖蛋白Ib单克隆抗体的制备、鉴定及其功能的初步研究

摘要：

目的:制备抗人血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)单克隆抗体(mAb),并进行生化鉴定与初步探讨其临床应用.方法:采用血小板免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合.经间接ELISA法筛选和克隆化培养,获得1株抗人GPIb mAb的杂交瘤细胞,纯化其腹水获得mAb;免疫双扩散鉴定其抗体亚类;流式细胞术和免疫放射法鉴定其识别的抗原;ELISA法检测该抗体对血浆血管性血友病因子(vWF)的瑞斯托霉素辅因子活性的影响.结果:成功制备了1株抗人GPIb mAb,命名为SZ-151.ELISA法测定其腹水效价为1:20 000,免疫双扩散鉴定其为IgG1亚类.免疫放射法和流式细胞术检测结果证实SZ-151和mAb SZ-2识别同一抗原GPIb,且作用位点不同.ELISA结果显示,SZ-151对瑞斯托霉素辅因子活性无抑制作用.结论:获得1株新的抗血小板膜糖蛋白Ib 的mAb,可用于血浆vWF的瑞斯托霉素辅因子活性检测,为血管性血友病的诊断和分型提供了有效的工具.

关键词：血小板、糖蛋白Ib、单克隆抗体、血管性血友病因子

所属期刊栏目：27

分类号：Q813.2(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金资助项目30971287;江苏省自然科学基金资助项目BK2009108;江苏省高校自然科学基金资助项目Q2122808

在线出版日期：2011-09-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：650-652,656