抗胰岛素样生长因子I型受体单克隆抗体的制备及鉴定
目的:制备和鉴定抗胰岛紊样生长因子I型受体(IGF-IR)单克隆抗体(mAb),为深入研究肿瘤细胞中IGF-IR 功能及致病机制奠定基础.方法:用脂质体法将制备的重组慢病毒载体三质粒pWPXL-IGF-IR、PMD2G、PAX2共转染包装细胞293T,将上清病毒转染目的细胞NIH-3T3,通过Western blot检测稳转NIH-3T3细胞中IGF-IR的表达.将细胞株NIH3T3-IGF-IR免疫BALB/c小鼠,提取小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0进行杂交融合,筛选出针对IGF-IR的特异性杂交瘤细胞株,Western blot鉴定单克隆细胞株的特异性.并检测其免疫球蛋白亚类及mAb效价.结果:通过细胞融合和克隆化,筛选出1株持续分泌抗IGF-IR mAb的杂交瘤细胞株9F3.该抗体能与IGF-IR特异性结合,经鉴定该抗体属于IgG1亚类.结论:成功地制备了抗IGF-IR mAb,为研究IGF-IR在肿瘤中的生物学功能奠定了基础.
胰岛素样生长因子I型受体、慢病毒载体、杂交瘤、单克隆抗体
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Q813.2(生物工程学(生物技术))
2011-09-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
647-649