猪新基因P58IPK的分子克隆、原核表达及其多克隆抗体的制备
目的:分子克隆出猪P58IPK新基因,制备其多克隆抗体,为下一步研究流感病毒与宿主相互作用机制提供条件.方法:根据猪EST数据库,利用生物信息学方法,电子克隆猪P58IPK新基因;采用RT-PCR方法从猪淋巴组织分子克隆P58IPK基因完整开放阅读框(ORF),全长1 518 bp,编码505个氨基酸(GenBank登录号:HQ287801),并对其进行初步生物信息学分析;构建P58IPK原核表达载体pET-P58IPK,诱导表达并纯化重组的his-P58IPK融合蛋白,后免疫兔子制备多克隆抗体.结果:成功制备P58IPK多克隆抗体,通过双向琼脂扩散实验检测抗体有活性,ELISA鉴定血清中多抗效价达到1:20 000,Western blot与免疫荧光检测反应特异性良好.结论:成功克隆猪新基因P58IPK,并制备了其多克隆抗体.
猪P58IPK、多克隆抗体、ELISA、Western、blot、免疫荧光
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Q78;R392.7(基因工程（遗传工程）)
国家自然科学基金面上项目31072115;国家自然科学基金面上自由申请项目30270342
2011-09-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
637-640
