抗人生长转化因子15单克隆抗体制备及鉴定

摘要：

目的:制备抗人生长转化因子15(GDF15)单克隆抗体(mAb)并鉴定其特性.方法:构建GDF15原核表达载体pGEX-4T-2-gdf75,诱导表达并纯化GST-GDF15融合蛋白.以该融合蛋白免疫BALB/c小鼠,取小鼠的脾细胞与同系小鼠Sp2/0骨髓瘤细胞常规融合,依次进行阳性杂交瘤细胞株的筛选及亚克隆,最终获得稳定分泌抗GDF15 mAb杂交瘤细胞株.以间接ELISA法检测抗体效价;Western blot鉴定抗体特异性;免疫共沉淀法初步检测在肝癌患者血清中GDF15表达水平.结果:获得1株稳定分泌抗人GDF15 mAb杂交瘤细胞株,命名为9G3;抗体免疫球蛋白亚类为IgGI,轻链为K型;免疫共沉淀及质谱分析证实抗GDF15 mAb9G3能与肝癌患者血清中GDF15蛋白特异性结合并且GDF15水平在肝癌患者血清中较正常人显著升高.结论:成功制备了抗人GDF15mAb,为后期肝癌早期诊断试剂盒的开发奠定了良好的基础.

关键词：GDF15、单克隆抗体、HCC

所属期刊栏目：27

分类号：R392.11

资助基金：卫生部科学研究基金资助项目wkj2004-2-12;南京医科大学肿瘤中心招标课题08ZIKf06

在线出版日期：2011-09-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：539-541,544