人肠道病毒71型VPO蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

摘要：

目的:原核表达并纯化人肠道病毒71型(EV71)VPO蛋白,免疫豚鼠制备多克隆抗体,并鉴定其用于EV71检测的反应性和特异性.方法:PCR方法扩增VPO基因,构建原核表达质粒pET-VPO并转化大肠杆菌,诱导表达并纯化VPO重组蛋白,免疫豚鼠制备抗VPO多克隆抗体,ELISA方法检测抗VPO抗体效价,细胞免疫荧光和Western blot方法鉴定抗体特异性.结果:VPO重组蛋白在大肠杆菌BL21中高效表达,制备的抗VPO抗体效价为1:106.细胞免疫荧光及Western blot检测结果显示,抗VPO多克隆抗体可以识别原核表达及EV71感染细胞中的VPO蛋白.结论:原核表达了EV71的VPO蛋白并制备出抗VPO多克隆抗体,为EV71的临床诊断、疫苗开发和分子病毒学研究提供了新的研究工具和手段.

关键词：手足口病、人肠道病毒71型、VPO、多克隆抗体

所属期刊栏目：27

分类号：R392.11

资助基金：中国科学院"百人计划"项目KSCX2-YW-BR-2;生化工程国家重点实验室开放基金项目2010KF-07

在线出版日期：2011-09-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：535-538