蓝藻抗病毒蛋白-N的制备、生物活性鉴定及其多克隆抗体的制备和修饰

摘要：

目的:纯化CVN重组蛋白,检测其抗病毒活性,制备CVN多克隆抗体,并对其进行纯化和修饰.方法:利用两步Ni-NTA亲和层析和一步SUMO酶切制备CVN抗原,CPE法观察其抗病毒活性,活性抗原免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,ELISA及Western blot鉴定其效价和特异性,抗血清经硫酸铵初步沉淀和DEAE离子交换层析获得纯化抗体,纯化抗体通过辣根过氧化物酶(HRP)标记获得修饰抗体.结果:纯化获得纯度达95%以上且具有明显抗流感病毒作用的非融合CVN,利用所得CVN抗原成功制备CVN多克隆抗体,酶联免疫分析显示其效价达到1:16000以上,Western blot分析表明其具明显特异性.抗血清经盐析和DEAE离子柱层析后获得效价为1:6400高纯度纯化抗体,经HRP修饰后获得具有较高生物活性的标记抗体.结论:获得高纯度,高效价兔抗CVN多克隆抗体,以及HRP标记的兔抗CVN多克隆抗体,为后续研究奠定了基础.

关键词：CVN、抗病毒活性、多克隆抗体、修饰抗体

所属期刊栏目：27

分类号：R392.11

资助基金：国家科技支撑计划资助2008BA163B05;国家自然科学基金面上项目30873082;暨南大学"211"经费资助2010

在线出版日期：2011-09-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：531-534