融合蛋白mTSLPR-Ig的表达、纯化及其鉴定

摘要：

目的:构建含小鼠TSLPR胞外段与小鼠Ig Fe段融合基因的腺病毒表达载体(Ad-mTSLPR-Ig),体外表达、纯化并鉴定可溶性融合蛋白mTSLPR-Ig.方法:运用PCR方法从小鼠胸腺cDNA文库中扩增mTSLPR胞外段基因,构建并鉴定mTSLPR胞外段与小鼠Ig Fc段融合基因的腺病毒表达载体(Ad-mTSLPR-Ig);将Ad-TSLPR-mIg转染COS-7细胞,收集细胞上清液;采用双抗体ELISA夹心法检测上清中融合蛋白表达;经蛋白A亲和层析,制备纯化可溶性融合蛋白mTSL-PR-Ig.结果:经测序证实,所构建表达载体的目的基因片段mTSLPR-Ig序列正确,成功包装出腺病毒表达载体Ad-mTSL-PR-Ig; ELISA法检测到上清中融合蛋白mTSLPR-Ig的表达;通过亲和层析法获得纯化的融合蛋白,经Western blot鉴定融合蛋白表达无误.结论:成功获得可溶性融合蛋白mTSLPR-Ig,为进一步研究其生物学特性奠定基础.

关键词：TSLPR、可溶性受体、TSLP、哮喘

所属期刊栏目：27

分类号：R392.12

资助基金：中国博士后科学基金项目20070411050;江苏省博士后科研资助计划项目0701023B

在线出版日期：2011-09-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：511-514