pDsRed1-C3/XAPC7真核表达载体的构建及细胞定位

摘要：

目的:构建pDsRedl-C3/XAPC7真核表达载体并观察其在786-0.293T和Chang liver细胞株中的定位情况.方法:采用RT-PCR法从HBE135-E6E7细胞株中克隆得到XAPC7cDNA全长序列,将之与pMD18T载体连接、测序后将该片段亚克隆到真核表达载体pDsRedl-C3中.构建好的pD-sRedl-C3/XAPC7真核表达质粒经酶切和测序鉴定后,采用脂质体法将该重组质粒转染786-0.293T和Chang liver细胞株中,观察其在真核细胞中的表达.结果:pDsRedl-C3/XAPC7重组子经酶切鉴定及DNA测序证实,目的基因XAPC7的序列完全正确,真核表达载体构建成功,转染该重组子的细胞株均可见红色荧光蛋白的表达,呈颗粒状分布.XAPC7主要定位于786-O细胞的胞质,胞核罕见,在293T细胞中,胞质和胞核均有分布,且两者间无明显差别,在Chang
liver细胞中,胞质和胞核亦均有分布,但以胞质为主.结论:成功构建pDsRedl-C3/XAPC7融合基因并进行真核表达,发现XAPC7在不同细胞中的细胞定位具有差异,为下一步研究XAPC7的肿瘤相关功能奠定基础.

关键词：XAPC7、真核表达载体、构建、细胞株、细胞定位

所属期刊栏目：27

分类号：R392.12

资助基金：广东省科技计划资助项目2008B030301032

在线出版日期：2011-09-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：507-510