抗重金属Cr3+单克隆抗体的制备及其应用
目的:制备重金属Cr3+的单克隆抗体(mAb)并建立间接竞争ELISA法,用于Cr3+的检测.方法:用合成的重金属铬-螯合剂-BSA抗原免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合、克隆化和ELISA等技术建立杂交瘤细胞株;腹水型mAb经硫酸铵沉淀纯化后建立间接竞争ELISA法并与9种金属进行交叉实验;水样加标后,进行间接竞争ELISA法与ICP-AES法检测Cr3+的比较,计算两种方法符合率.结果:获得3株稳定分泌抗重金属Cr3+mAb的杂交瘤细胞株,其中5G12C5株mAb间接ELISA效价>1:1×105,间接竞争ELISA法检测Cr3+的范围为0.783~50μg/L,最低检测限为1μg/L,与Fe3+存在<10%交叉,而与其他金属无交叉反应;当水样中加标量>1μg/L时,间接竞争ELISA法与ICP-AES法检测Cr3+的符合率达96.95%.结论:获得效价高、特异性强的重金属Cr3+mAb,初步建立了检测Cr3+的间接竞争ELISA法.该方法检测的灵敏度可达到国家地下Ⅰ类水的检测标准(0.005 mg/L).
重金属、Cr3+、细胞融合、单克隆抗体、ELISA
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R392.12
国家"863"高技术发展计划目标导向项目2008AA10Z427
2011-07-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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