pcDNA3.0-RKIP重组质粒构建及其在PC12细胞中的表达

摘要：

目的:构建RKIP真核表达质粒,并检测其在PC12细胞中的表达.方法:从大鼠背根神经节细胞中提取总RNA,应用巢式PCR技术,扩增获得RKIP基因编码序列片段,克隆入真核表达载体pcDNA3.0,对重组质粒进行酶切和测序鉴定后,以Vigofect非脂质体介导法转染至PC12细胞,通过Western blot检测RKIP蛋白的表达.结果:酶切和测序结果证明pcDNA3.0-RKIP重组质粒的DNA序列完全正确,将其转染PC12细胞后,RKIP蛋白表达明显增加.结论:pcDNA3.0-RKIP真核表达质粒构建成功,并能在PC12细胞内表达,为深入研究RKIP的神经生物学功能提供了实验基础.

关键词：RKIP、重组质粒、基因转染、PC12细胞

所属期刊栏目：27

分类号：Q684(物理因素对生物的作用)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30770527;国家科技重大专项2008ZXJ09004-019

在线出版日期：2011-07-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：399-401,404