甲型H1N1流感病毒非结构蛋白NS1真核表达载体的构建与表达

摘要：

目的:构建甲型H1N1流感病毒非结构蛋白NS1真核表达载体并表达其编码蛋白(转染293T细胞).方法:从江苏首例甲型H1NI流感病毒毒株(A/Nanjing/1/2009(H1N1))提取病毒RNA, 采用RT-PCR技术扩增NS1全长基因, 将其克隆至pMD18-T Vector中构建pMD18-T-NS1质粒, 双酶切pMD18-T-NS1与PXJ40-HA后, 构建真核表达载体PXJ40-HA-NS1,经酶切及测序鉴定后将质粒转染到293T细胞中, 通过Western blot鉴定NS1蛋白的表达.结果:经双酶切、测序鉴定证实NS1基因的真核表达载体构建成功.Western blot法可见NS1基因编码蛋白的成功表达.结论:成功克隆NS1全长基因, 并构建了其真核表达载体, 该表达载体的构建为后期建立稳定表达NS1蛋白的细胞模型和NS1蛋白功能研究提供了材料.

关键词：甲型H1N1流感病毒、NS1、真核表达、免疫印迹

所属期刊栏目：27

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：江苏省自然科学基金资助项目BK2009433;江苏省卫生厅资助项目Z200919

在线出版日期：2011-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：287-289