红景天苷对小鼠腹腔巨噬细胞体外增殖、凋亡、吞噬、ROS和NO产生的影响
目的:研究红景天苷(Sal)对小鼠腹腔巨噬细胞体外增殖、凋亡、吞噬、胞内活性氧簇(ROS)及分泌一氧化氮(NO)的影响,初步探讨其对小鼠腹腔巨噬细胞的免疫调节作用.方法:无菌分离小鼠腹腔巨噬细胞,并制备单细胞悬液,以不同终浓度(80μmol/L、160 μmol/L及320 μmol/L)的Sal 和巨噬细胞共培养4 h,再以脂多糖(LPS)和γ-干扰素(IFN-γ)进行共刺激.利用MTT比色法检测Sal对巨噬细胞体外增殖的影响.用放线菌酮(CHX)诱导巨噬细胞凋亡,用Sytox(R)Green染色结合荧光酶标仪检测Sal对CHX诱导巨噬细胞凋亡的影响.用流式细胞术(FCM)检测Sal对巨噬细胞吞噬功能的影响.用2-7-二氯氢化荧光素乙二脂(H2DCFDA)染色法结合荧光酶标仪检测Sal对胞内ROS产生的影响;用Griess 反应检测Sal对巨噬细胞分泌NO的影响.结果:MTT比色法检测显示,终浓度为80、160、320 μmol/L的Sal均可显著促进LPS+IFN-γ刺激巨噬细胞增殖(P<0. 05).荧光酶标仪检测Sytox雪Green染色法的结果显示,160μ mol/L的sal可抑制CHX诱导的巨噬细胞凋亡(P<0. 01).FCM结果显示,各浓度的Sal均能促进单纯药物组和实验药物组LPS+IFN-γ刺激巨噬细胞的吞噬功能(P<0. 05).用荧光酶标仪检测DH2DCFDA染色结果表明,各浓度的Sal对LPS+IFN-γ刺激的巨噬细胞胞内ROS的产生均具有显著的抑制作用(P<0. 01).Griess反应检测NO含量的结果显示,各浓度的Sal对LPS+IFN-γ刺激巨噬细胞产生NO均具有促进作用(P<0. 05).结论:Sal对LPS和IFN-γ刺激的巨噬细胞增殖具有显著的促进作用,对CHX诱导的巨噬细胞凋亡具有显著的抑制作用,对静息态和活化态的巨噬细胞的吞噬功能均有增强作用,并能减少LPS和IFN-γ活化的巨噬细胞胞内ROS的产生;但能促进LPS和IFN-γ活化的巨噬细胞NO的分泌.
红景天苷、腹腔巨噬细胞、增殖、凋亡、吞噬、活性氧、一氧化氮
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R282.17(中药学)
国家重点基础研究发展计划973资助项目2006CB504201,2004CB720100;国家自然科学基金资助项目30500466466;广东省自然科学基金资助项目5300419
2011-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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