γδT细胞经唑来膦酸刺激后对骨肉瘤细胞的杀伤作用
目的:探讨外周血γδT细胞经唑来膦酸刺激后对骨肉瘤细胞株HOS的体内外杀伤作用及相关机制.方法:取健康人外周血5mL,经唑来膦酸刺激后,在含IL-2的培养液中,培养14d.用流式细胞仪测定γδT细胞所占的比例,用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测其对骨肉瘤细胞株HOS的体外杀伤作用,并用抗人γδTCR抗体、抗人NKG2D抗体和穿孔素/颗粒酶阻滞剂CMA分别预处理γδT细胞,观察杀伤作用的变化.另用骨肉瘤细胞株HOS注入BALB/c裸鼠皮下建立骨肉瘤裸鼠种植瘤模型.随机将裸鼠分为2组,分别为未治疗组、γδT细胞治疗组.观察裸鼠瘤体大小及称量瘤重.结果:PBMCs经唑来膦酸刺激14d后γδT细胞阳性率达到(95±3)%.当效靶细胞比为6:1、12:1、25:1、50:1时,对HOS细胞的杀伤率分别为26.8%、31.5%、37.8%、40.9%.用Anti-γδTCR抗体、Anti-NKG2D抗体及CMA预处理γδT细胞后,当效靶细胞比为25:1时,对HOS的杀伤率分别为32.3%、4.7%、16.7%.体内抑瘤实验中,γδT细胞治疗组的肿瘤生长抑制率为42.78%.结论:PBMCs经唑来膦酸刺激后,可获得高纯度的γδT细胞,在体内外其对骨肉瘤细胞株HOS有较强的杀伤作用.
γδT细胞、唑来膦酸、细胞毒活性、裸鼠、免疫治疗
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R392.12
国家自然科学基金资助项目30973444
2011-03-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1195-1197