通过差减文库筛选文昌鱼神经胚中特异表达的基因

摘要：

目的:构建文昌鱼12h神经胚与6h原肠胚的差减cDNA文库,以期从中挑选出在神经、肌肉、体轴发育过程中特异表达的基因,以便对文昌鱼早期胚胎的发育调控机制进行进一步研究.方法:分别从文昌鱼12h胚胎和6h胚胎提取总RNA,反转录成cDNA,以文昌鱼12h胚胎的cDNA作为tester,并以6h胚胎的cDNA作为driver,经过两轮杂交和抑制性PCR扩增,产物与T载体连接,经蓝白斑筛选,提取质粒DNA,EcoR I酶切鉴定插入片段,由此构建文昌鱼早期两个不同发育时期的差减cDNA文库.结果:对200个文库克隆进行了测序,筛选到一些可能在文昌鱼12h神经胚中特异表达的基因.结论:成功构建了文昌鱼12h/6h胚胎差减cDNA文库,所获得的12h神经胚中特异表达的基因,为进一步对文昌鱼早期发育调控机制进行研究提供了材料.

关键词：文昌鱼、抑制性差减杂交、差减cDNA文库、特异表达基因

所属期刊栏目：26

分类号：Q754(分子遗传学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30470902;山东省自然科学基金资助项目Y2007D13

在线出版日期：2011-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1178-1181