蛋白激酶NUAK1的定位及其与NF-κB信号通路关系的探讨
目的:确定蛋白激酶NUAK1的定位,检测其是否参与NF-κB信号通路.方法:构建质粒NUAK1-pEGFP顺转于293细胞,然后用DAPY染核,荧光显微镜下观察NUAK1的定位.构建质粒NUAK1-pcDNA3.1和显性失活突变体NUAK1(D178N)-pcDNA 3.1,以空载pcDNA3.1做对照,分别过表达于带稳转有NF-κB荧光酶素报告基因质粒的293细胞株中,检测在有或没有TNF-α刺激下的NF-κB荧光酶素报告基因的活性,为进一步确认,对NUAK1-pcDNA3.1设了个浓度梯度进行检测.结果:293细胞中,NUAK1定位于细胞核.在TNF-α的刺激下,以空载和显性失活突变体为对照,NUAKI显著抑制NF-κB的活性,且与其表达量成正相关.结论:由于NUAK1定位于细胞核中,且显著抑制TNFα刺激下NF-κB的活性,所以NUAK1可能参与NF-κB的转录调控.
NUAK1/ARK5、NF-κB、293细胞、核定位、转录调控
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R349.5(人体生物化学、分子生物学)
2011-03-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
998-1001