氯化钴对人eNOS基因启动子SP3替换改构体转录活性的影响

摘要：

目的:构建改造的人血管内皮细胞一氧化氮合酶基因启动子,利用氯化钴诱导的人脐静脉血管内皮细胞-12缺氧模型研究其基因启动子活性变化.方法:含SP1替换SP3突变序列的引物通过PCR构建突变启动子pGL2-eNOS-repSP3载体,将已经构建好的pGL2-eNOS-repSP3载体和pGL2-eNOS分别转染HUVEC-12细胞,并以之前构建的SP1插入eNOS启动子改构体pGL2-eNOS-insSP1为阳性对照,通过双荧光素酶报告基因技术检测并比较不同浓度氯化钴刺激下eNOS启动子转录活性的变化.结果:成功构建了含SP1替换SP3突变序列的eNOS启动子改构体.氯化钴刺激后转染细胞,改构体eNOS启动子活性在一定范围内呈现随氯化钻剂量增加而升高的趋势;SP1替换SP3的eNOS启动子转录活性与SP1插入的eNOS启动子之间无显著差异.结论:pGL2-eNOS-rep-SP3和pGL2-eNOS-insSP1两种改造方法在转录活性上没有显著差别.

关键词：一氧化氮合酶、转染、启动子、内皮细胞、氯化钴

所属期刊栏目：26

分类号：R392.12

资助基金：国家自然科学基金资助项目30471635,30971465;广东省自然科学基金资助项目04010451,5006033;暨南大学"211工程"基金资助项目2009年

在线出版日期：2011-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：754-757