疏水作用层析法纯化抗乙肝病毒核心抗原单克隆抗体
目的:采用疏水作用层析法纯化小鼠腹水来源的抗乙肝核心抗原(HBcAg)单克隆抗体(mAb),并对分离条件进行优化.方法:采用不同疏水层析介质、溶液pH和NaCl浓度,研究其对抗体吸附的影响,以及分析不同的洗脱方式和洗脱体积对抗体洗脱的影响,并用ELISA法检测纯化后抗体的活性.结果:疏水作用层析法纯化小鼠腹水来源的抗HB-cAg mAb(IgG1)的最适条件是以pH7.0、20 mmol/L PB+1.2mol/L(NH4)2SO4为上样缓冲液,采用1.2～0 mol/L(NH4)2SO4,12 CV梯度进行洗脱,获得的mAb纯度大于75%,回收率达80%,纯化后mAb的活性保持良好.结论:采用疏水作用层析对mAb进行纯化,并优化了各步实验条件,为建立具有抗体纯度高、生物学活性好、易于放大的抗HBcAg的mAb的纯化方法提供了必要的实验基础.
层析、疏水作用、单克隆抗体、乙肝核心抗原
26
Q511(蛋白质)
杭州市科技局重大科技创新专项资助项目20080211A19
2011-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
560-562
