麻痹性贝类毒素GTX2,3模拟表位的初步研究

摘要：

目的:利用噬菌体展示随机肽库筛选可模拟麻痹性贝类毒素GTX2,3抗原表位的噬菌体,初步鉴定人工合成的GTX2,3抗原表位肽的特异性.方法:以抗麻痹性贝类毒素GTX2,3单克隆抗体(mAb)为靶分子,对噬菌体随机12肽库进行3轮免疫亲和筛选,以夹心ELISA方法鉴定噬菌体克隆,竞争ELISA鉴定阳性噬菌体克隆的特异性.对阳性克隆进行DNA测序并推导噬菌体所展示的氨基酸序列.竞争ELISA鉴定模拟GTX2,3表位的合成肽的特异性.结果:经过3轮筛选获得20株能与靶分子高亲和力结合的阳性噬菌体克隆.序列分析表明DXLXPP为保守序列(X为任意氨基酸).竞争ELISA检测表明,麻痹性贝类毒素GTX2,3可抑制阳性噬菌体克隆phage 2与抗GTX2,3 mAb结合.根据阳性序列合成的短肽可以抑制phage 2与抗GTX2,3 mAb的结合(IC50=13μg/mL).结论:通过噬菌体肽库筛选技术,成功地获得麻痹性贝类毒素GTX2,3的模拟表位,并初步证实以此为基础合成的短肽能够准确和特异的模拟GTX2,3的表位.

关键词：噬菌体展示肽库、麻痹性贝类毒素GTX2、3、模拟表位肽

所属期刊栏目：26

分类号：R329.11(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目40376030

在线出版日期：2011-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：530-532