腺病毒介导重组人单链IL-27融合基因在肝癌细胞的表达及活性鉴定

摘要：

目的:利用腺病毒表达系统在肝癌细胞表达有生物活性的单链重组人白细胞介素27(dascIL-27)并检测其生物学活性.方法:将rhselL-27基因片段从pcDNA3.1载体克隆到腺病毒载体pAdTrack-CMV,然后在细菌内与pAdEasy同源重组构建AdIL-27腺病毒载体并转染293细胞包装、扩增腺病毒颗粒.将重组腺病毒感染肝癌细胞株HepG2,荧光显微镜、RT-PCR及ELISA等方法进行检测蛋白表达情况,IFN-γ诱生实验检测rhsclL-27的生物学活性.结果:成功构建AdIL-27腺病毒载体,经293细胞包装扩增后感染HepG2细胞观察到有GFP表达,RT-PCR及ELISA检测到细胞有rhsclL-27表达,IFN-γ诱生实验证实表达的rhscIL-27具有诱导产生IFN-γ的生物学活性.结论:利用腺病毒表达系统成功在肝癌细胞表达有生物活性的重组人单链IL-27(rhscIL-27),并具有诱导产生IFN-γ的生物学活性,为研究IL-27的生物学功能及其对肝癌的基因治疗奠定了基础.

关键词：白细胞介素-27、基因表达、腺病毒、转染

所属期刊栏目：26

分类号：R392.11

资助基金：四川省科技厅应用基础研究项目05JY029-119

在线出版日期：2011-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：518-521