负载pCTLA4-Ig基因的猪未成熟树突状细胞抑制异种脾细胞的增殖

摘要：

目的:建立猪外周血来源的未成熟树突状细胞(im-DC)体外诱导、扩增方法.探讨负载猪源性pCTLA4-Ig重组腺病毒的猪imDCs对大鼠脾细胞增殖的影响.方法:家猪外周血单个核细胞(PBMC),以rpGM-CSF(30μg/L)和rpIL-4(20μg/L)体外诱导培养,收集悬浮细胞经电镜、流式细胞仪鉴定.利用Adv-pCTLA4-Ig转染猪imDCs,RT-PCR鉴定.对比转染组与未转染组imDCs刺激SD大鼠脾细胞增殖的能力.结果:获得第4～5天悬浮细胞具有典型的imDCs形态特征,表达猪源性DC的特异性标志SLA-DR、CD172a,而CD80/CD86表达较低.Adv-pCTLA4-Ig转染猪imDCs行RT-PCR出现pCTLA4-Ig、吲哚胺2,3-二氧化酶(IDO)基因的表达.混合淋巴细胞培养转染组与未转染组imDCs刺激指数有显著性差异(P<0.05).结论:联合应用rpGM-CSF和rpIL-4可诱导猪PBMC衍生成大量的imDCs.负载pCTLA4-Ig基因的猪imDCs,能够表达IDO,降低对异种抗原的免疫应答,显著抑制异种脾细胞增殖.

关键词：树突状细胞、重组腺病毒、CTLA4-Ig、免疫耐受

所属期刊栏目：26

分类号：R392.11

资助基金：国家自然科学青年基金资助项目30700772

在线出版日期：2011-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：434-437