不同条件下骨髓间充质干细胞分离培养及其生物学特性研究
目的:探讨并优化大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外分离培养的方法,筛选出最佳培养时间,并鉴定其生物学特性,为BMSCs的应用奠定基础.方法:在不同季节,采用贴壁筛选法分离纯化BMSCs,并通过传代培养对其进行扩增.倒置光学显微镜下观察细胞形态及生长特征,并按时间段绘制细胞生长曲线.流式细胞术检测BMSCs抗原分子CD90及造血干细胞抗原分子CD45的表达;用β-巯基乙醇诱导BMSCs分化.结果:生长曲线分析,冬季培养的BMSCs乃代潜伏期为4 d,对数期为5～9 d,第10天后进入平台期,细胞出现接触抑制现象;春、夏、秋三季培养的BMSCs F3代潜伏期为2 d,对数增殖期为3～6 d,第7天后进入平台期,细胞出现接触抑制现象.流式细胞术检测F0代细胞中,CD90+CD45-细胞为3.5%,乃代细胞中CD90+CD45-细胞达到97%;F3代BMSCs镜下呈梭形、多角形成纤维细胞样形态,大小均一,漩涡状生长.β-巯基乙醇诱导BMSCs 5 h后表现出明显的神经元样细胞形态.结论:不同培养季节对BMSCs生长曲线影响明显,春夏秋三季细胞生长较快,而冬季细胞生长缓慢,体现了"春生、夏长、秋收、冬藏"的生物规律;贴壁筛选法是理想的体外分离扩增BMSCs的培养体系,所培养的BMSCs纯度高、生物学性状稳定.
骨髓间充质干细胞、培养季节、生物学特性
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R331(人体生理学)
国家中医药管理局基金资助项目04-05JQ05;甘肃省教育厅基金资助项目034B-02
2011-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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