人脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶单克隆抗体抗原表位的鉴定及应用

摘要：

目的:研究鉴定人脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶单克隆抗体(hAPE1 mAb)的抗原表位,并建立定量检测hAPE1的ELISA一步法.方法:设计并合成:LPE1-15肽阵列,鉴定hAPE1 mAb 2-G1和4-F6的抗原表位,应用三维立体结构观察软件Molsoft.ICM-Pro模拟hAPE1 mAb抗原表位的立体结构;采用改良的过碘酸钠法标记抗体,以hAPE1 mAb为捕获抗体和酶标抗体,建立hAPE1的ELISA一步检测法.结果:APE1-15肽阵列检测结果和抗原表位三维结构显示,2-G1 mAb的抗原表位对应为hAPE1天然蛋白氨基酸残基序列的76-90位和109-123位,位于氧化还原区域,为构象型抗原表位;4-F6 mAb的抗原表位对应为hAPE1天然蛋白氨基酸序列的109-147位,位于DNA修复内切酶活性区.ELISA一步法检测hAPE1蛋白的线性范围为8.0～200μg/L,最低检测限为2.0μg/L.平均批内变异系数为8.67%,平均批间变异系数为12.45%,平均回收率为105.47%.结论:hAPE1 2-C1 mAb和4-F6 mAb具有不同的抗原表位,成功建立的hAPE1 ELISA一步法为简便、快速、准确检测血清中hAPE1的含量奠定了基础.

关键词：人脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶、单克隆抗体、抗原表位、ELISA一步法

所属期刊栏目：26

分类号：Q813.2(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金面上资助项目30872975

在线出版日期：2010-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：258-260