抗GBM抗体特异性单链抗体scFv3原核表达载体的构建及表达
目的:构建单链抗体scFv3的原核表达载体pET28a-scFv3并诱导表达,纯化并检测表达产物的免疫抗原性.方法:用PCR扩增抗肾小球基底膜(GBM)抗体单链抗体scFv3基因,构建pGEM-scFv3重组质粒并测序.将重组基因亚克隆于原核表达载体pET28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,亲和层析法纯化,用间接ELISA检测纯化的单链抗体scFv3的免疫抗原性.结果:酶切和测序证实得到的scFv3基因序列正确.间接ELISA检测表明,纯化获得的scFv3能与抗GBM抗体结合.结论:成功构建了pET28a-scFv3原核表达系统并获得纯化的scFv3蛋白.表达产物具有良好的抗原性,为进一步研究该单链抗体在抗GBM抗体病中的治疗作用奠定了基础.
pET28a-scFv3、蛋白表达、纯化、抗GBM抗体
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Q782(基因工程（遗传工程）)
国家卫生部资助项目WKJ2007-2-033;河南省医学科技攻关重大项目200701006
2010-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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