翻译控制肿瘤蛋白TPT1的原核表达、纯化、抗体制备和初步应用
目的:原核表达并纯化翻译控制蛋白TPT1,免疫日本大耳白兔制备其抗体.方法:构建原核表达质粒pRSETA_2-TPT1,转化大肠杆菌BL21(DE3),TPT1蛋白经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.融合蛋白通过Ni-NTA树脂亲和纯化后免疫兔子制备抗体血清.以间接ELISA法检测抗体效价,Western blot和免疫荧光染色鉴定抗体特异性.结果:在大肠埃希菌中诱导出高水平表达的TPT1融合蛋白,经亲和树脂纯化后免疫大白兔,获得了高特异性的抗TPT1抗血清.结论:成功构建原核表达质粒pRSETA_2-TPT1,表达并纯化TPT1蛋白,制备出高滴度、高特异性的多克隆抗体.为进一步研究TPT1在肿瘤等疾病发生、发展过程及治疗中的作用奠定基础.
TPT1、原核表达、纯化、抗体、肿瘤
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R392.11
国家自然科学基金资助项目30873017;天津市自然科学基金重点项目08JCZDJC23300,09JCZDJC17500;国家高技术研究发展计划863资助项目2007AA021808
2010-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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