葡萄球菌分离株肠毒素sek基因的分布及其蛋白的表达纯化
目的:了解国内葡萄球菌分离株携带肠毒素sek基因的分布情况,获得纯化的重组SEK蛋白并初步了解其生物学活性.方法:应用PCR方法检测葡萄球菌属122株分离株sek分布,克隆了葡萄球菌PTJ-2分离株的sek成熟肽基因,构建了重组质粒pGEX-6P-sek、pET28一sek重组表达载体,经GST亲和层析、镍螯合层析,制备纯化的重组蛋白GST-SEK、P28-SEK.通过Western Not检测重组蛋白的免疫原性及其诱导小鼠脾淋巴细胞凋亡的能力.结果:122株葡萄球菌属分离株sek基因的检出率为23%(28/122);PTJ-2分离株与已报道sek基因的同源性在97.62%以上.获得2种具有良好免疫原性,表达量占菌体蛋白的24%、17%的可溶性重组蛋白.结论:除已报道的金黄色葡萄球菌外,国内非致病性葡萄球菌分离株也可携带sek基因.PTJ-2国内分离株SEK蛋白与已报道同型肠毒素存在3个氨基酸变异.重组的SEK蛋白可诱导小鼠脾淋巴细胞凋亡.
葡萄球菌、肠毒素K、表达、纯化
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R378.1(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
天津市应用基础及前沿技术研究计划项目08JCZDJC22600
2010-05-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
220-222