PCB77人工抗原的合成及多克隆抗体的制备
目的:制备PCB77人工抗原和多克隆抗体,为建立其免疫学检测方法提供技术准备.方法:以3,4-二氯苯基乙酸为半抗原,在低温和弱碱性条件下,采用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法将其与载体BSA偶联,制备PCB77的人工抗原,计算结合比为23:1,免疫家兔获得了PCB77的多克隆抗体.采用混合酸酐法将半抗原与OVA偶联,结合比为8:1,用作ELISA检测包被原.间接ELISA检测结果表明,2只兔子的抗血清效价均达1:20 000以上.抗血清经辛酸一硫酸铵沉淀法纯化后通过ELISA检测验证了PCB77人工抗原的有效性,通过方阵滴定法确定ELISA的最佳工作浓度,建立标准曲线.在0.75~300 ng/L范围内,抑制率与PCB77的质量浓度对数呈显著的线性关系,检测限达到4.44μg/L.结论:合成的PCB77人工抗原具有较好的免疫效果,纯化后的抗体符合后续实验的条件要求,为研制和开发PCB77免疫检测试剂盒奠定了基础.
3、4-二氯苯基乙酸、偶联率、人工抗原、多克隆抗体、ELISA
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R994.6(毒物学(毒理学))
山东省重大科技专项资助2006GGll08097-24;山东省自然科学基金资助Y2006B26;山东省农业科学院博士基金资助项目2006YBS024
2010-04-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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