CD59配体肽真核表达系统的构建及对PC-3细胞活性的作用研究

摘要：

目的:构建CD59分子配体肽sp22基因重组真核表达系统,探讨sp22基因对CD59分子的影响.方法:构建含特异性sp22基因的真核重组表达载体sp-pIRES,脂质体法转染人前列腺癌PC-3细胞,G418筛选建立稳定转染细胞系,RT-PCR检测转染细胞中sp22基因mRNA的表达筛选阳性细胞克隆,Western blot、ELISA竞争抑制试验检测转染细胞CD59蛋白的表达;台盼蓝染色实验和LDH实验测sp22基因对CD59分子功能的影响.结果:PCR、酶切及DNA测序鉴定表明成功构建了sp-PIRES重组表达载体;RT-PCR试验证实sp22在spPC-3细胞中成功表达;Western blot、ELESA竞争抑制试验表明:spPC-3细胞比正常PC-3细胞CD59蛋白表达减少(P＜0.05);与正常PC-3细胞相比,补体对spPC-3细胞的溶解杀伤明显增强(P＜0.05).结论:sp22基因可在mRNA及蛋白水平影响人前列腺癌PC-3细胞表面CD59抗原的表达及功能,降低CD59分子抗补体活性,有望用于肿瘤治疗.

关键词：CD59、配体肽、RT-PCR、PC-3细胞、补体

所属期刊栏目：26

分类号：R392.12

资助基金：国家自然科学基金资助项目30170893

在线出版日期：2010-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：80-83