介导可溶性MHCⅠ产生的去整合素金属蛋白酶初步筛选研究

摘要：

目的:以HEK293细胞为研究模型,筛选介导可溶性MHC Ⅰ产生的去整合素金属蛋白酶.方法:将ADAM8、ADAM10、ADAM15和ADAM17 cDNA分别克隆入pcDNA3.1/V5载体,并用TransIT(R)-LT1转染试剂将构建好的载体转染入HEK293细胞,用潮霉素B筛选ADAMs蛋白稳定表达克隆;用SDS-PAGE、免疫印迹结合化学发光法检测ADAMs在HEK293细胞中的表达;用细胞表面生物素标记、免疫沉淀、SDS-PAGE、免疫印迹结合化学发光检测ADAMs过表达对可溶性MHC Ⅰ产生的影响.结果:成功获得稳定表达ADAMs的HEK293细胞;过表达ADAM10和ADAM17可增强HEK293细胞产生可溶性MHC Ⅰ.结论:ADAM10和ADAM17具介导可溶性MHC Ⅰ产生的潜能.

关键词：主要组织相容性复合体、去整合素金属蛋白酶

所属期刊栏目：26

分类号：Q71(生物大分子的结构和功能)

资助基金：国家重点基础研究发展规划973资助项目2010CB933900;国家高技术研究发展计划863资助项目2007AA022004

在线出版日期：2010-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：47-48