转录因子T-bet和Eomes对不同亚类人T细胞产生IFN-γ的调控作用

摘要：

目的:探讨转录因子T-bet和Eomes对不同亚类人T细胞产生IFN-γ的调控作用.方法:化学合成针对人T-bet和Eomes基因的小干扰RNA(siRNA),转染体外培养的CD3单克隆抗体(mAb)活化的αβT细胞和Mtb-Ag活化的γδT细胞,利用流式细胞仪分选纯化CD4~+、CD8~+T细胞和γδT细胞,半定量RT-PCR检测CD4~+、CD8~+T淋巴细胞中T-bet和Eomes mRNA的表达变化,流式细胞术(FCM)检测转染前后IFN-γ产生的变化情况.结果:经过连续2次转染,siRNA-FAM~+细胞可达50%.转染T-bet-siRNA后,CD4~+T细胞IFN-γ~+细胞率(18.46±6.86)%,比阴性对照组(50.20±5.91)%,明显降低(P＜0.01),而CD8~+T细胞转染T-bet-siRNA,IFN-γ~+细胞率(74.18±9.33)%,与阴性对照组(76.51±6.49)%无统计学意义;转染Eomes-siRNA,CD4~+T细胞IFN-γ~+细胞率(50.92±6.78)%,与对照组无统计学意义;而CD8~+T细胞IFN-γ~+细胞率(25.37±7.11)%,比阴性对照组(76.51±6.49)%,明显降低(P＜0.01).MtbAT转染T-bet-siRNA和Eomes-siRNA后,γδT细胞IFN-γ~+细胞率分别为(56.57±6.67)%和(42.53±5.13)%,比阴性对照组(76.52±2.58)%均明显降低(P＜0.01).结论:在转录因子水平,T-bet和Eomes分别是调控CD4~+、CD8~+T淋巴细胞IFN-γ产生的重要转录因子,而两者可能同时参与了γδT细胞IFN-γ产生的调节.

关键词：siRNA、t-bet、IFN-γ、淋巴细胞

所属期刊栏目：26

分类号：R392.11

资助基金：安徽省自然科学基金项目050430603;安徽省教育厅省高校省级重点实验室重点科研项目2004sys008

在线出版日期：2010-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：31-34