9型重组腺相关病毒转染体外培养大鼠心肌细胞的影响

摘要：

目的:研究含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的9型重组腺相关病毒(rAAV9)对大鼠心肌H9C2细胞的转染及对细胞生长的影响.方法:rAAV9-EGFP按转染复数(MOI)1×10~5、1×10~6、1×10~7转染H9C2细胞,转染后在倒置荧光显微镜下观察H9C2细胞中EGFP阳性表达情况,采用流式细胞仪检测rAAV9-EGFP对H9C2细胞的转染效率.观察转染后细胞生长形态,并用Alamar Blue法检测rAAV9-EGFP对H9C2细胞增殖影响.结果:转染后第1天,MOI=1×10~6、1×10~7组中EGFP开始表达;第2天,MOI=1×10~5组开始表达,各组EGFP表达强度随MOI值的增高而增强,同时EGFP的表达强度随着时间延长而逐渐增强;转染后第4天达到高峰,此时流式细胞术检测rAAV9-EGFP对H9C2细胞的转染率分别为MOI=1×10~5组:(14.1±0.2)%、MOI=1×10~6组:(35.1±4.8)%、MOI=1×10~7组:(56.8±0.1)%.rAAV9-EGFP转染H9C2细胞后,细胞生长及形态正常,Alamar Blue法进一步检测表明转染组对H9C2细胞增殖无影响.结论:rAAV9-EGFP能够有效地转染H9C2细胞,且rAAV9-EGFP对H9C2细胞增殖无明显抑制.

关键词：9型重组腺相关病毒、增强型绿色荧光蛋白、心肌细胞、转染

所属期刊栏目：26

分类号：R331.3(人体生理学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30760263;新疆自治区卫生厅青年科技人才专项基金2007Y23

在线出版日期：2010-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：18-20