负向调节树突状细胞对心脏移植大鼠调节性T细胞的影响
目的:探讨受者树突状细胞(DC)与体外光化学法(PUVA)处理的供者脾淋巴细胞共培养,对心脏移植受者CD4~+CD25~+调节性T细胞(Treg)及移植心存活时间的影响.方法:以DA大鼠为供者,Lewis大鼠为受者,SD大鼠为无关供者,建立大鼠腹部异位心脏移植模型.分离正常的供者脾淋巴细胞(SP),制备经PUVA处理的供者脾淋巴细胞(PUVA-SP).在体外将DA大鼠PUVA-SP或SP与受者骨髓来源的DC共同培养,收集经上述处理后受者DC,流式细胞术(FCM)检测其表面分子CD80、CD86以及OX6的表达状况.根据受者术前静脉输注的成分将实验动物随机分为3组:①Control组:单纯输注PBS,n=7;②SP DC组:输注加载供者sP的受者大鼠DC,n=8;③PUVA-SPDC组:输注加载PUVA处理的供者SP的受者大鼠DC,n=8.移植术前7 d,经外周静脉给受者输注与PUVA-SP共培养后的DC(PUVA-SPDC组)、正常受者DC(DC组)或只输注PBS(Control组),移植术后观察受者移植物的存活时间,检测受者外周血中CD4~+CD25~+T细胞、CD4~+CD25~(high) T细胞的比例及其Foxp3表达状况.过继转移PUVA-SP DC组受者大鼠的T细胞后,检测正常LEW大鼠对供者抗原或无关抗原的DTH反应.结果:受者DC与供者未经处理的脾淋巴细胞(SP)混合培养后,其表面分子CD80、CD86以及ox6的表达分别为16.6%±0.72%、36.5%±0.87%及65.6%±1.45%,明显高于未处理DC组(3.53%±0.27%、13.0%±0.57%及27.7%±1.23%)(P＜0.01);而受者DC与PUVA处理过的供者脾淋巴细胞(PUVA-SP)混合培养后,其表面分子的表达仍保持较低的水平,CD80、CD86以及OX6的表达分别为3.9%±0.12%、13.4%±0.59%及28.0%±1.73%,与未经任何处理的受者DC无统计学差异(P＞0.05).移植术后,PUVA-SPDC组受者,外周血CD4~+CD25~+T、CD4~+CD25~(high) T细胞占CD4~+T的比例分别是18.97%和3.81%,明显高于输注DC组(4.40%和0.81%)和Control组(3.11%和0.09%)的大鼠(P＜0.01).PUVA-SP DC组大鼠外周血CD4~+CD25~+T细胞中Foxp3表达率为29%±1.73%,CIM'CD25~(high) T细胞中Foxp3阳性率高达95%±1.67%,均明显高于对照组(12%±0.58%和19.3%±2.03%)及DC(16.3%±0.88%和52.0%±1.73%)组(P＜0.01).PUVA-SP DC组大鼠移植心存活时间为(27.3±0.98)d,与Control组(6.7±0.29)d及DC组(11.0±0.32)d相比,明显延长(P＜0.01).过继转移实验显示,接受PUVA-SP DC组受者T细胞的正常LEW大鼠对DA大鼠抗原的刺激呈特异性免疫低应答状态.结论:PUVA-SP DC能够在移植受者体内诱生CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg,同时诱导抗原特异性免疫低反应,进而延长异基因移植物的存活时间.
树突状细胞、PUVA、心脏移植、调节性T细胞、大鼠
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R392.12
全军"十一五"计划科技攻关项目06G115;北京市自然科学基金面上课题7072078;解放军总医院科技创新苗圃基金09KMM32
2010-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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