人CD133基因转染细胞株的建立及其生物学功能的初步研究

摘要：

目的:构建人干细胞标记分子CD133-2转基因细胞并探讨CD133-2分子的生物学功能.方法:利用分段克隆和重叠PCR方法从人胎肝cDNA文库中克隆出人CD133-2全长基因,经双酶切后装入真核表达载体p IRES2-EGFP中,用脂质体法转染L929细胞,加入G418选择性培养基进行筛选.经RT-PCR、Western blot、流式细胞术(FCM)等方法鉴定转基因细胞;MTT法分析转基因细胞对T细胞的体外增殖作用;流式细胞仪分析T细胞表面活化分子标记CD4CD25、CD8CD25的表达.结果:成功克隆和构建了能稳定表达人CD133-2分子的转基因细胞CD133-2/L929,该转基因细胞与T细胞共培养可抑制其体外增殖,下调T细胞表面分子CD4cD25和CD8CD25的表达.结论:稳定表达CD133-2蛋白的转基因细胞株的建立为该基因功能的后续研究奠定了物质基础.

关键词：CD133、基因转染、肿瘤干细胞、T细胞

所属期刊栏目：26

分类号：R392.2

资助基金：国防科工委基金资助项目A3820060130

在线出版日期：2010-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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