真核表达载体p4ARE-TK-GFP/Neo的构建及其表达

摘要：

目的:构建真核表达载体p4ARE-TK-GFP/Neo, 并在HepG2细胞中进行表达.方法:PCR法扩增TK启动子克隆到pEGFP-N1上, 构建表达载体pTK-GFP/Neo.人工合成4个ARE序列, 经退火和磷酸化后插入pTK-GFP/Neo载体的TK启动子上游, 构建由TK启动子启动以及上游有4个ARE调控的真核表达载体p4ARE-TK-GFP/Neo, 将其转染入HepG2细胞株并筛选, 进行稳定表达.结果:成功构建了真核表达载体p4ARE-TK-GFP/Neo, 并建立HepG2细胞稳定表达株.结论:成功地构建了由TK启动子启动以及上游有4个抗氧化反应元件(ARE)重复序列调控的真核表达载体p4ARE-TK-GFP/Neo, 并在HepG2细胞中稳定表达, 为下一步研究ARE的调控作用奠定了基础.

关键词：抗氧化反应元件(ARE)、绿色荧光蛋白(GFP)、真核表达载体、HepG2细胞

所属期刊栏目：25

分类号：R392.11

资助基金：江苏省研究生培养创新工程资助项目CX07S_042z;国家自然科学基金资助项目30873343

在线出版日期：2010-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1008-1009,1012